尊敬的用户:
感谢您选择北京天根生化科技有限公司的一步法逆转录PCR试剂盒。本产品专为高效、便捷地进行RNA反转录及后续PCR扩增而设计,旨在为您提供可靠、稳定的实验解决方案。为了确保最佳使用效果,请在操作前仔细阅读并遵循以下说明。
一、产品概述
天根一步法逆转录PCR试剂盒采用先进的一步法技术,将逆转录和PCR反应整合于同一管内完成,有效减少人为误差,提高实验效率。试剂盒包含优化的反应缓冲液、高活性逆转录酶以及热启动DNA聚合酶等关键组分,适用于多种来源的RNA样本检测。
二、主要特点
- 高灵敏度:通过优化的配方实现对低丰度目标基因的有效扩增。
- 特异性增强:独特的引物设计与酶体系相结合,显著降低非特异性扩增。
- 操作简便:从RNA到最终产物仅需一个简单的程序即可完成。
- 广泛适用性:适合各种类型的RNA样本(如总RNA、mRNA等)。
三、储存条件
- 试剂盒应储存在-20℃下以保持其活性。
- 避免反复冻融,建议分装后长期保存。
- 使用前请平衡至室温,并轻轻混匀所有成分。
四、实验步骤
1. 准备工作
- 确保所有试剂均已在室温下平衡至少30分钟。
- 根据实验需求准备所需的RNA模板。
2. 反应设置
按照说明书提供的比例配置反应体系,具体参数如下:
- 总体积:20 μL
- RNA模板量:0.5–2 μg
- 引物浓度:根据实验设计调整
3. 反应程序
将配置好的反应液置于PCR仪中运行以下程序:
- 42°C, 30 min(逆转录阶段)
- 95°C, 5 min(预变性)
- 循环次数:30–40次
- 95°C, 15 s
- 60°C, 30 s
- 最终延伸:72°C, 5 min
4. 结果分析
反应结束后,可直接使用琼脂糖凝胶电泳或实时荧光定量PCR设备对产物进行检测。
五、注意事项
- 实验过程中务必佩戴手套并使用无RNA酶耗材。
- 若出现异常结果,请检查样本质量和实验条件是否符合要求。
- 如需进一步技术支持,请联系本公司客服部门获取帮助。
六、售后服务
我们承诺为每一位客户提供优质的售前咨询及售后支持服务。如果您在使用过程中遇到任何问题,请随时与我们联系,我们将竭诚为您解答疑惑。
再次感谢您选择天根一步法逆转录PCR试剂盒!希望它能助您顺利完成科研任务!
北京天根生化科技有限公司
2023年10月
以上内容基于您的标题进行了扩展编写,旨在提供详细且实用的信息指导用户正确使用该试剂盒。希望对您有所帮助!